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NUTRIENTE HAM F-10


 









CARACTERÍSTICAS FÍSICO-QUÍMICAS:

· Aspecto : polvo amarillo-rosado homogéneo
· Tamaño de las partículas: aproximadamente 20 micrones
· Solubilidad : solución límpida en la concentración de uso (1X)
. pH a 25oC (sin NaHCO3): 6,8 + 0,25
· pH a 25oC (con NaHCO3): 7,5 + 0,25
. Osmolaridad (sin NaHCO3): 252 + 5%
· Osmolaridad (con NaHCO3): 282 + 5%

CONSERVACIÓN:
almacenar el medio en polvo o preparado líquido entre 2 y 6oC. Si esas condiciones no son mantenidas, podrán ser observadas lãs siguientes alteraciones:
1. Cambios de color
2. Granulaciones
3. Insolubilidad
4. Alteración de pH
5. Incapacidad de mantener la integridad celular en condiciones normales.

PREPARACIÓN: El medio HAM F-12 en polvo es extremadamente higroscópico, debiendo ser protegido del medio ambiente. No se recomiendan preparaciones de concentraciones mayores a las especificadas, debido a la posibilidad de formación de precipitados.

1. Medir aproximadamente 90% del volumen a ser preparado de agua tridestilada (15 - 20oC).
2. Agregar lentamente el polvo agitando constantemente. NO CALIENTE EL AGUA.
3. Después que el polvo este totalmente disuelto, agregue 1,2g de bicarbonato de sodio al 5,6%, por litro.
4. Adicionar antibióticos u otras sustancias que crea que son necesarias.
5. El pH puede ser ajustado conforme deseado, utilizando HCl 1N o NaOH 0,1N, o gasificándolo con CO2.
6. Completar el volumen con agua tridestilada y esterilizar por filtración en membranas de 0,22m, utilizando presión positiva.



DEFINICIÓN: es una mezcla de sales enriquecida con aminoácidos, vitaminas y otros componentes esenciales para el crecimiento celular.

ACCIÓN: actúa como solución nutritiva en cultivo celular.

INDICACIÓN: se destina al cultivo de células humanas y de animales. Este medio es distribuido en polvo y líquido. La presentación en polvo tiene la ventaja de mantenerse estable por más de 24 meses, si es conservado bien cerrado y refrigerado. Otra gran ventaja del medio en polvo es la constancia de resultados cuando se programan cultivos celulares a largo plazo utilizando, en ese caso, un mismo lote. Por su contenido de piruvato de sodio el HAM F-10 es un medio muy usado en reproducción, pero tiene otras diversas aplicaciones porque tiene una serie de nutrientes que facilitan el metabolismo celular.

VENTAJAS: testado en por lo menos tres linajes diferentes, además de cultivo en linfocitos, siendo siempre determinado su pH y osmolaridad. Cada lote solamente es liberado si está dentro de los estándares físicos y biológicos, además de los relativos a la promoción del crecimiento celular.


COMPOSICIÓN NUTRIENTE HAM F-10

SALES INORGÁNICAS
mg/L
 
L-Serina
10,50
CaCl2.2H2O
44,100
 
L-treonina
3,57
CuSo4.H2O
0,0025
 
L-triptófano
0,80
FeSO4.7H2O
0,834
 
L-tirosina
2,61
KCl
285,000
 
L-valina
3,50
MgCl6H2O
123,000
 
VITAMINAS
mg/L 
NaCl
7.599.000
 
Biotina
0,024
NaHCO3
1.176,000
 
Pantotenato Calcio
0,715
Na2HPO4
142,040
 
Cloruro de colina
0.698
 
 
 
Ácido Fólico
1.320
AMINOÁCIDOS
mg/L
 
Inositol
0.541
L-alanina
9,00
 
Niacinamida
0,615
L-arginina.HCL
211,00
 
Piridoxina.HCl
0,206
L-asparagina.H2O
15,01
 
Riboflavina
0,376
L-ácido aspártico
13,00
 
Tiamina
1,000
L-cisteína
35,00
 
Vitamina B-12
1,360
L-ácido glutámico
14,70
 
 
 
L-glutamina
146,00
 
OTROS COMPONENTES
mg/L
Glicina
7,58
 
Glucosa
1.100,00
L-histidina.HCl.H2O
23,00
 
Hipoxantina
4,00
L-isoleucina
3.94
 
Ácido Lipoico
0,21
L-leucina
13,00
 
Rojo de Fenol
1,20
L-lisina
36.5
 
Piruvato de Sodio
110,00
L-metionina
4,48
 
Timidina
0,70
L-fenilalanina
5,00
L-prolina
34.50