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 MEDIO MEM (EARLE)
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CARACTERÍSTICAS FÍSICOQUÍMICAS:
- Aspecto: polvo rosáceo y homogéneo
- Tamaño de las Partículas: aproximadamente 20 micrones
- Solubilidad : solución límpida en la concentración de uso (1x)
- pH a 25oC (sin NaHCO3): 5,9 + 0,5
- pH a 25oC (con NaHCO3): 7,60 + 0,5
- Osmolaridad (sin NaHCO3): 250 + 5%
- Osmolaridad (con NaHCO3): 295 + 5%
CONSERVACIÓN: almacenar el medio en polvo o preparado líquido entre 2 y 6oC. Si esas condiciones no son mantenidas, podrán ser observadas las siguientes alteraciones:
1. Cambios de color
2. Granulaciones
3. Insolubilidad
4. Alteración de pH
5. Incapacidad de mantener la integridad celular bajo condiciones normales.
PREPARACIÓN: el MEDIO DULBECCO MEM en polvo es extremadamente higroscópico y debe ser protegido del medio ambiente. No se recomiendan preparaciones de concentraciones mayores a las especificadas, debido a la gran posibilidad de formación de precipitados.
1. Medir aproximadamente 90% del volumen a ser preparado de agua tridestilada (15 - 20oC).
2. Adicionar lentamente el polvo agitando constantemente. NO CALIENTE EL AGUA.
3. Después que el polvo este disuelto, agregue 2,2g de bicarbonato de sodio al 5,6% por litro.
4. Agregue antibióticos u otras sustancias que crea que sean necesarias.
5. Pode obtenerse el pH deseado utilizando HCl 1N o NaOH 0,1N o gasificando con CO2.
6. Completar el volumen con agua tridestilada y esterilizar por filtración en membranas de 0,22m, utilizando presión positiva.
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DEFINICIÓN: es una mezcla de sales enriquecida con aminoácidos, vitaminas y otros componentes esenciales para el crecimiento celular.
ACIÓN: actúa como una solución nutritiva en cultivo celular.
INDICACIÓN: se destina al cultivo de células humanas y de otros animales. Este medio es distribuido en polvo y líquido. La presentación en polvo tiene la ventaja de mantenerse estable por más de 24 meses cuando se conserva bien cerrado y refrigerado. Otra gran ventaja del medio en polvo es la constancia de resultados cuando se programan cultivos celulares a largo plazo, utilizando en ese caso un mismo lote. El MEDIO MEM es considerado una solución nutritiva estándar en cultivo de células por poseer los nutrientes básicos para el mantenimiento celular. Este medio puede ser usado con aminoácidos esenciales, no esenciales o aun variando cualquier otro componente.
VENTAJAS: Probado en por lo menos tres linajes celulares diferentes, siendo siempre determinados su pH y osmolaridad. Cada lote es liberado solo si está dentro de los límites adecuados, además de promover un óptimo crecimiento celular. |
COMPOSICIÓN MEDIO MEM
SALES INORGÁNICAS |
mg/L |
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L-treonina |
48,00 |
CaCl2.H2O |
264,87 |
L-triptófano |
10,00 |
KCl |
400,00 |
L-tirosina |
52,10 |
MgSO4.7H2O |
200,00 |
L-valina |
46,00 |
NaCL |
6.800,00 |
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NaHCO3 |
2.200,00 |
VITAMINAS |
mg/L |
NaH2PO4.H2O |
140,00 |
pantotenato de cálcio |
1,00 |
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cloruro de colina |
1,00 |
AMINOÁCIDOS |
mg/L |
ácido fólico |
1,00 |
L-alanina |
8,90 |
inositol |
2,00 |
L-arginina.HCL |
126,00 |
nicotinamida |
1,00 |
L-asparigina |
15,00 |
piridoxal.HCL |
1,00 |
L-ácido aspártico |
13,30 |
riboflavina |
0,10 |
L-cistina |
31,29 |
tiamina.HCL |
1,00 |
L-ácido glutámico |
14,70 |
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L-glutamina |
292,00 |
OTROS COMPONENTES |
mg/L |
glicina |
7,50 |
glucosa |
1.000,00 |
L-histidina.HCl.H2O |
42,00 |
rojo de fenol |
10,00 |
L-isoleucina |
52,00 |
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L-leucina |
52,00 |
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L-lisina.HCl |
72,00 |
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L-metionina |
15,00 |
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L-fenilalanina |
32,00 |
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L-prolina |
11,50 |
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L-serina |
10,50 |
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