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MEDIO DULBECCO MEM |
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CARACTERÍSTICAS FÍSICOQUÍMICAS:
-Aspecto : Polvo rosáceo y homogéneo
-Tamaño de las Partículas : aproximadamente 20 micrones
-Solubilidad : solución límpida en la concentración de uso 1X
-pH a 25oC (Sin NaHCO3) : 6,3 + 0,5
-pH a 25oC (Con NaHCO3) : 7,7 + 0,5
-Osmolaridad (sin NaHCO3) : 234 + 5%
-Osmolaridad (con NaHCO3) : 310 + 5
CONSERVACIÓN: almacenar el medio en polvo o preparado líquido entre 2 y 6oC. Si esas condiciones no son mantenidas, podrán ser observadas las siguientes alteraciones:
1. Cambios de color
2. Granulaciones
3. Insolubilidad
4. Alteración de pH
5. Incapacidad de mantener la integridad celular bajo condiciones normales.
PREPARACIÓN: el MEDIO DULBECCO MEM en polvo es extremadamente higroscópico y debe ser protegido del medio ambiente. No se recomiendan preparaciones de concentraciones mayores a las especificadas, debido a la gran posibilidad de formación de precipitados.
1. Medir aproximadamente 90% del volumen a ser preparado de agua tridestilada (15 - 20oC).
2. Adicionar lentamente el polvo agitando constantemente. NO CALIENTE EL AGUA.
3. Después que el polvo este disuelto, agregue 3,7g de bicarbonato de sodio al 5,6% por litro.
4. Agregue antibióticos u otras sustancias que crea que sean necesarias.
5. Pode obtenerse el pH de acuerdo a lo deseado, utilizando HCl 1N o NaOH 0,1N o gasificando con CO2.
6. Completar el volumen con agua tridestilada y esterilizar por filtración en membranas de 0,22m, utilizando presión positiva.
PRESENTACIÓN :
Polvo: frascos con polvo para 1, 10 o 50 litros
Líquido: frascos con 100 o 500 ml
CONSERVACIÓN : 2 a 6ºC
VALIDAD : 12 meses
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DEFINICIÓN: es una mezcla de sales enriquecida con aminoácidos y otros componentes esenciales para el crecimiento celular.
ACCIÓN : Actúa como una solución nutritiva en cultivo celular.
INDICACIÓN: se destina al cultivo de células humanas (diploides, melona, etc.) y de otros animales. Este medio es distribuido en polvo y como líquido. La presentación en polvo tiene la ventaja de mantenerse estable por más de 24 meses cuando conservado bien cerrado y refrigerado. Otra gran ventaja del medio DULBECCO EN POLVO es la constancia de resultados cuando se programan cultivos celulares a largo plazo, utilizando en ese caso un mismo lote. Determinadas células crecen muy bien con este medio, como células de pulmón fetal, riñón y células de linaje.
VENTAJAS: Probado en por lo menos tres linajes celulares diferentes, siendo siempre determinados su pH y osmolaridad. Cada lote es liberado solo si está dentro de los límites adecuados, además de promover un óptimo crecimiento celular. |
COMPOSICIÓN DULBECCO MEM (DMEM)
SALES INORGÁNICAS |
mg/L |
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L-serina |
42,00 |
CaCl2H2O |
265,00 |
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L-treonina |
95,00 |
Fe(NO3)3.9H2O |
0,10 |
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L-triptofano |
16,00 |
KCL |
400,00 |
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L-tirosina |
104,20 |
MgSO4.7H2O |
200,00 |
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L-valina |
94,00 |
NaCL |
6.400,00 |
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NaH2PO4H2O |
125,00 |
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VITAMINAS |
mg/L |
NaHCO3 |
3.700,00 |
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Cloruro de Colina |
4,00 |
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pantotenato de calcio |
4,00 |
AMINOÁCIDOS |
mg/L |
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ácido fólico |
4,00 |
L-arginina.HCL |
84,00 |
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Inositol |
7,20 |
L-cistina |
62,57 |
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nicotinamida |
4,00 |
L-glutamina |
584,00 |
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piridoxal.HCL |
4,00 |
glicina |
30,00 |
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riboflavina |
0,40 |
L-histidina.HCL.H2O |
42,00 |
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tiamina.HCL |
4,00 |
L-isoleucina |
105,00 |
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L-leucina |
105,00 |
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OTROS COMPONENTES |
mg/L |
L-lisina.HCL |
146,00 |
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glucosa |
1.000,00 |
L-metionina |
30,00 |
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piruvato de sodio |
110,00 |
L-fenialanina |
66,00 |
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rojo de fenol |
15,00 |
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