 |
MEIO 199 (EARLE)
 |
|
CARACTERÍSTICAS FÍSICO-QUÍMICAS:
-Aspecto
: pó róseo e homogêneo
-Tamanho das partículas: aproximadamente 20
microns
-Solubilidade:solução límpida na concentração de uso (1x)
-pH à 25°C (sem NaHCO3) : 4,12 + 0,5
-pH à 25°C (com NaHCO3) :7,40
+ 0,5
-Osmolaridade (sem NaHCO3) : 250 + 5%
-Osmolaridade (com
NaHCO3) : 290 + 5%
CONSERVAÇÃO: Estocar o meio em pó ou o
preparado líquido entre 2 a 6°C. Se essas condições não forem mantidas
poderão ser observadas alterações do tipo:
1. Mudança de cor
2. Granulações
3. Insolubilidade
4. Alteração de pH
5.
Incapacidade de manter a integridade sob condições normais.
PREPARAÇÃO: O MEIO
199 em pó é extremamente higroscópico devendo ser protegido do meio
ambiente. Não são recomendadas preparações de concentrações maiores que
aquelas especificadas devido a grande possibilidade de formação de
precipitados.
1. Medir aproximadamente 90% do volume a ser
preparado de água tridestilada (15-20°C).
2. Adicionar lentamente o pó
sob agitação constante. NÃO AQUEÇA A ÁGUA.
3. Depois que o pó estiver
totalmente dissolvido, acrescentar por litro 2,2g de bicarbonato de sódio
5,6%.
4. Acrescentar antibióticos ou outras substâncias que julgar
necessário.
5. Poder-se-á acertar o pH conforme o desejado,
utilizando-se HCl 1N ou NaOH 0,1N, ou ainda gaseificando-se com CO2.
Completar o volume com água tridestilada e esterilizar por
filtração em membranas de 0,22m, utilizando pressão
positiva.
APRESENTAÇÃO: PÓ - Frascos com pó para preparo de 1, 10 e 50
litros.
LÍQUIDO - Frasco com 100 ou 500 ml.
CONSERVAÇÃO: 2 à 6°C
VALIDADE: 12 meses |
|
DEFINIÇÃO: É uma mistura de sais
enriquecidos com aminoácidos, vitaminas e outros componentes essenciais
para o crescimento celular.
AÇÃO: Age como uma
solução nutritiva em cultivo celular.
INDICAÇÃO: Destina-se a cultura de células humanas e de outros animais. Este meio é
fornecido na forma líquida e em pó. Na forma em pó, ele tem a vantagem de
se manter estável por mais de 24 meses se conservado bem fechado e em
geladeira. Outra grande vantagem do meio em pó é a constância de
resultados quando se programam culturas celulares a longo prazo,
utilizando nesse caso um mesmo lote. O MEIO 199 por ser pobre em ácido
fólico é mais utilizado para pesquisa do sítio frágil do cromosso X, além
disso ele apresenta uma infinidade de vitaminas que facilitam o
metabolismo celular.
VANTAGENS: Testado em pelo
três linhagens diferentes, sendo sempre determinado o seu pH e
osmolaridade, cada lote só é liberado se estiver dentro dos limites
adequados, além de promover um ótimo crescimento celular. |
COMPOSIÇÃO MEIO
199
SAIS ORGÂNICOS |
|
|
Biotina |
0,010 |
|
|
Calciferol |
0,100 |
|
|
Pantotenato de cálcio |
0,010 |
MgSO47H2O |
200,00 |
Cloreto de colina |
0,500 |
|
|
Ácido fólico |
0,010 |
C2H3O2Na |
50,00 |
Inositol |
0,050 |
|
6.800,00 |
Menadione |
0,010 |
|
2.200,00 |
Ácido nicotinico |
0,025 |
|
125,00 |
Niacinamida |
0,025 |
|
|
Ácido p-aminobenzóico |
0,050 |
AMINOÁCIDOS |
mg/L |
Piridoxal.HCL |
0,025 |
L-alanina |
25,00 |
Piridoxina.HCL |
0,025 |
L-arginina.HCL |
70,00 |
Riboflavina |
0,010 |
L-ácido aspártico |
30,00 |
Tiamina.HCl |
0,010 |
L-cisteína.HCL.H2O |
0,11 |
Acetato de retinol |
0,140 |
L-cistina |
26,00 |
Fosfato de tocoferol Na |
0.01 |
L-ácido glutâmico |
75,00 |
|
|
L-glutamina |
100,00 |
|
mg/L |
Glicina |
50,00 |
|
10,00 |
L-histidina.HCL.H2O |
21,88 |
Adenosina trifosfato -2 Na
|
1,00 |
hidroxiprolina |
10,00 |
Adenosina monofosfato -Na
|
0,20 |
L-isoleucina |
20,00 |
|
0,20 |
L-lisina.HCL |
70,00 |
|
0,50 |
L-fenilalanina |
25,00 |
|
1000.00 |
L-leucina |
60,00 |
|
|
L-metionina |
15,00 |
|
|
L-prolina |
40,00 |
|
|
L-serina |
25,00 |
|
|
L-treonina |
30,00 |
|
|
L-triptofano |
10,00 |
Xantina
Na |
0.344 |
L-tirosina |
57,70 |
|
|
L-valina |
25,00 |
|
|
|
|
|
|
VITAMINAS |
mg/L |
|
|
Ácido ascórbico |
0,050 |
|
|
IMPORTANTE:
Todos os Meios Líquidos VITROCELL
prontos para uso contém antibiótico/antimicótico
Sulfato de Gentamicina: 50 mg/L
Anfotericina B: 25 µg/ml
|
|
|