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 MEIO LEIBOWITZ L-15
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CARACTERÍSTICA
FISIO-QUÍMICAS
• Aspecto: Pó róseo e homogêneo
• Tamanho das
partículas: aproximadamente 20 micras
• Solubilidade: solução límpida
na concentração de uso (1X)
• pH a
25°C (Sem NaHCO3): 8,1 ± 0,30
• Osmolaridade: 320+5%
Conservação: Estocar o meio em pó ou
preparado líquido entre 2 à 6°C. Se essas condições não forem mantidas,
poderão ser observadas alterações do tipo:
1. Mudança de cor
2.
Granulações
3. Insolubilidade
4. Alteração de pH
5. Incapacidade
de manter a integridade celular sob condições normais.
Preparação: MEIO LEIBOWITZ L-15 em pó é extremamente higroscópico,
devendo ser protegido do meio ambiente. Não são recomendadas preparações
de concentrações maiores que aquelas especificadas, devido a grande
possibilidade de formação de precipitados.
• Medir
aproximadamente 90% do volume a ser preparado e água tridestilada
(15 - 20ºC).
• Adicionar
lentamente o pó sob agitação constante. NÃO AQUEÇA A
ÁGUA.
• Acrescentar
antibióticos ou outras substâncias que julgar necessário.
• Poder-se-á acertar
o pH conforme o desejado, utilizando-se HCl 1N ou NaOH 0,1N, ou
ainda, gaseificando-se com CO2.
• Completar o volume com
água tridestilada e esterilizar por filtração em membranas de 0,22µ,
utilizando pressão positiva.
APRESENTAÇÃO: PÓ -
Frascos com pó para preparo de 1, 10 e 50 litros.
LÍQUIDO - Frasco com
100 ou 500 ml.
CONSERVAÇÃO : 2 à 6°C
VALIDADE : 12
meses
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Definição: É
uma mistura de sais enriquecidos com uma quantidade bem maior de
aminoácidos. Quando comparado aos outros meios possui ainda, vitaminas e
outros componentes essenciais para o crescimento celular. Foi desenvolvido
para uso em estufa de CO2, pois sua formulação não possui bicarbonato como
tampão.
Ação: É uma
solução altamente nutritiva para cultivo celular e, dependendo do uso, não
necessita estufa de CO2 para manutenção de pH.
Indicação: Destina-se a cultura de células
humanas, de outros animais, células de linhagem (HEp-2) e células de
insetos. Este meio é fornecido na forma em pó.
Na forma em pó ele tem a
vantagem de se manter estável por mais de 24 meses se conservado bem
fechado e em geladeira. Outra grande vantagem do meio em pó é a constância
de resultados quando se programam culturas celulares a longo prazo,
utilizando nesse caso um mesmo lote.
Vantagens: Por
ter tamponamento baseados em sais, nas bases livres de aminoácidos e
galactose, ao invés de glicose, ele mantém um bom auto-controle do pH
fisiológico. Testado em pelo menos três linhagens celulares diferentes,
sendo sempre determinado o seu pH e osmolaridade. Cada lote é liberado se
estiver dentro dos limites adequados, além de promover um ótimo
crescimento celular. |
COMPOSIÇÃO MEIO
LEIBOWITZ L-15
SAIS
INORGÂNICOS |
mg/L |
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AMINOÁCIDOS |
mg/L |
CaCl22H2O |
185,00 |
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L-alanina |
225,00 |
KCL |
400,00 |
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L-arginina (base livre) |
500,00 |
KH2PO4 |
60,00 |
|
L-asparigina.H2O |
125,00 |
MgCl26H2O |
200,00 |
|
L-cisteina (base livre) |
120,00 |
MgSO4 |
97,67 |
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L-glutamina |
300,00 |
MgSO47H2O |
------ |
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Glicina |
200,00 |
NaCl |
8.000,00 |
|
L-histidina (base
livre) |
250,00 |
Na2HPO4 |
190,12 |
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L-isoleucina |
125,00 |
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L-leucina |
125,00 |
VITAMINAS |
mg/L |
|
L-lisina |
75,00 |
Pantotenato de
Cálcio |
1,00 |
|
L-metionina |
75,00 |
Cloreto de
Colina |
1,00 |
|
L-fenilalanina |
125,00 |
Ácido Fólico |
1,00 |
|
L-serina |
100,00 |
Inositol |
2,00 |
|
L-treonina |
300,00 |
Piridoxina.HCL |
1,00 |
|
L-triptofano |
20,00 |
Nicotinamida |
1,00 |
|
L-tirosina |
100,00 |
Riboflavina |
0,10 |
|
L-valina |
200,00 |
Tiamina |
1,00 |
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OUTROS
COMPONENTES |
mg/L |
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D(+)
galactose |
900,00 |
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Vermelho de
fenol |
10,00 |
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Piruvato de
sódio |
550,00 |
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