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 MEIO MEM (EARLE)
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CARACTERÍSTICAS FÍSICO
QUÍMICAS:
-Aspecto: pó róseo e homogêneo
-Tamanho das
Particulas: aproximadamente 20 microns
-Solubilidade : solução límpida
na concentração de uso (1x)
-pH à 25°C (sem NaHCO3): 5,9 + 0,5
-pH
à 25°C (com NaHCO3): 7,60 + 0,5
-Osmolaridade (sem NaHCO3): 250
+ 5%
-Osmolaridade (com NaHCO3): 295 + 5%
CONSERVAÇÃO: Estocar
o meio em pó ou preparo líquido entre 2 à 6°C. Se essas condições não
forem mantidas, poderão ser observados alterações do tipo:
1.
Mudança de cor
2. Granulações
3. Insolubilidade
4. Alteração
de pH
5. Incapacidade de manter a integridade celular sob condições
normais.
PREPARAÇÃO: O MEIO MEM em pó é extremamente higroscópico devendo ser protegido do meio ambiente.
Não são recomendadas preparações de concentrações maiores que as
especificadas, devido a grande possibilidade de formação de precipitados.
1. Medir aproximadamente 90% do vlume a ser preparado de água
tridestilada (15-20°C).
2. Adicionar lentamente o pó sob agitação
constante. NÃO AQUEÇA A ÁGUA.
3. Depois que o pó estiver totalmente
dissolvido, acrescentar por litro 2,2g de bicarbonato de sódio 5,6%.
4.
Acrescentar antibióticos ou outras substâncias que julgar
necessário.
5. Poder-se-á acertar o pH conforme o desejado,
utilizando-se HCl 1N ou NaOH 0,1N, ou ainda gaseificando-se com CO2.
6.
Completar o volume cm água tridestilada e esterilizar por filtração em
membranas de 0,22m, utilizando pressão
positiva. |
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DEFINIÇÃO: É uma
mistura de sais enriquecida com aminoácidos, vitaminas e outros
componentes essenciais para o crescimento
celular.
AÇÃO: Age como ma solução nutritiva em
cultivo celular.
INDICAÇÃO: Destina-se a cultura
de células humanas e de outros animais. Este meio é fornecido na forma em
pó e líquida. Na forma em pó ele tem a vantagem de se manter estável por
mais de 24 meses, se conservado bem fechado, em geladeira. Outra grande
vantagem do meio em pó é a constância de resultados quando se programam
culturas celulares a longo prazo, utilizando nesse caso um mesmo lote. O
MEIO MEM é considerado uma solução nutritiva padrão em cultura de células
por possuir os nutrientes básicos para a manutenção celular. Este meio
pode ser fornecido com aminoácidos essenciais, não essenciais ou ainda
variando qualquer outro componente.
VANTAGENS:
Testado em pelo menos três linhagens celulares, sendo sempre determinado o
seu pH e osmolaridade, cada lote só é liberado se estiver dentro dos
limites adequados, além de promover um ótimo crescimento
celular. |
COMPOSIÇÃO MEIO
MEM
SAIS ORGÂNICOS |
mg/L |
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L-treonina |
48,00 |
CaCl2.H2O |
264,87 |
L-triptofano |
10,00 |
KCl |
400,00 |
L-tirosina |
52,10 |
MgSO4.7H2O |
200,00 |
L-valina |
46,00 |
NaCL |
6.800,00 |
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NaHCO3 |
2.200,00 |
VITAMINAS |
mg/L |
NaH2PO4.H2O |
140,00 |
Pantotenato de cálcio |
1,00 |
| |
Cloreto de colina |
1,00 |
AMINOÁCIDOS |
mg/L |
Ácido fólico |
1,00 |
L-alanina |
8,90 |
Inositol |
2,00 |
L-arginina.HCL |
126,00 |
Nicotinamida |
1,00 |
L-asparigina |
15,00 |
Piridoxal.HCL |
1,00 |
L-ácido aspártico |
13,30 |
Riboflavina |
0,10 |
L-cistina |
31,29 |
Tiamina.HCL |
1,00 |
L-ácido glutâmico |
14,70 |
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L-glutamina |
292,00 |
OUTROS COMPONENTES |
mg/L |
Glicina |
7,50 |
Glicose |
1.000,00 |
L-histidina.HCl.H2O |
42,00 |
Vermelho de fenol |
10,00 |
L-isoleucina |
52,00 |
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L-leucina |
52,00 |
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L-lisina.HCl |
72,00 |
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L-metionina |
15,00 |
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L-fenilalanina |
32,00 |
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L-prolina |
11,50 |
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L-serina |
10,50 |
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IMPORTANTE:
Todos os Meios Líquidos VITROCELL
prontos para uso contém antibiótico/antimicótico
Sulfato de Gentamicina: 50 mg/L
Anfotericina B: 25 µg/ml
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