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MEIO
RPMI 1640 |
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CARACTERÍSTICA FISIO-QUÍMICAS:
· Aspecto : Pó róseo e homogêneo
· Tamanho das Particulas : aproximadamente 20 microns
· Solubilidade : solução límpida na concentração de uso (1x)
· pH a 25°C (Sem NaHCO3) : 8,0 + 0,5
· pH a 25°C (ComNaHCO3) : 8,1 + 0,5
· Osmolaridade (sem NaHCO3) : 246 + 5%
· Osmolaridade (com NaHCO3) : 290 + 5%
CONSERVAÇÃO: Estocar o meio em pó ou preparado líquido entre
2 à 6°C. Se essas condições não forem
mantidas, poderão ser observadas alterações do
tipo:
1. Mudança de Cor
2. Granulações
3. Insolubilidade
4. Alteração de pH
5. Incapacidade de manter a integridade celular sob condições
normais.
PREPARAÇÃO: O MEIO RPMI 1640 em pó é
extremamente higroscópico, devendo ser protegido do meio ambiente.
Não são recomendadas preparações de concentrações
maiores que aquelas especificadas, devido a grande possibilidade de
formação de precipitados.
1.) Medir aproximadamente 90% do volume a ser preparado de água
tridestilada (15 - 20°C).
2.) Adicionar lentamente o pó sob agitação constante.
NÃO AQUEÇA A ÁGUA.
3.) Depois que o pó estiver totalmente dissolvido, acrescentar
por litro 2,0g de bicarbonato de sódio 5,6%.
4.) Acrescentar antibióticos ou outras substâncias que
julgar necessário.
5.) Poder-se-á acertar o pH conforme o desejado, utilizando-se
HCl 1N ou NaOH 0,1N, ou ainda, gaseificando-se com CO2.
6.) Completar o volume com água tridestilada e esterilizar
por filtração em membranas de 0,22m, utilizando pressão
positiva.
APRESENTAÇÃO: PÓ - Frascos com pó
para
preparo
de 1, 10 e 50 litros.
LÍQUIDO - Frasco com 100 ml.
CONSERVAÇÃO: 2 à 6°C
VALIDADE: 12 meses
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DEFINIÇÃO: É uma mistura de sais enriquecidos com aminoácidos, vitaminas e outros componentes essenciais para o crescimento celular.
AÇÃO: Age como uma solução nutritiva em cultivo celular.
INDIÇAÇÃO: Destina-se à cultura de células humanas e de outros animais. Este meio é fornecido na forma desidratada, em pó ou líquido. Na forma de pó ele tem a vantagem de se manter estável por mais 24 meses se conservado bem fechado e em geladeira. Outra grande vantagem do meio em pó é a constância de resultados quando se programam culturas celulares a longo prazo, utilizando nesse caso um mesmo lote. O MEIO RPMI 1640, por não ter timidina na sua composição, é muito utilizado para obter a sincronização da divisão celular.
VANTAGENS: Testado em pelo menos três linhagens diferentes, sendo sempre determinado o seu pH e osmolaridade, cada lote só é liberado se estiver dentro dos limites adequados, além de promover um ótimo crescimento celular. |
COMPOSIÇÃO MEIO
RPMI 1640
SAIS INORGÂNICOS |
mg/L |
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L-triptofano |
5,00 |
Ca(NO3)2.4H2O |
100,00 |
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L-prolina |
20,00 |
KCL |
400,00 |
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L-tirosina |
28,00 |
MgSO4.7H2O |
100,00 |
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L-serina |
30,00 |
NaCl |
6.000,00 |
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L-valina |
20,00 |
NaHCO3 |
2.000,00 |
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L-treonina |
20,00 |
Na2HPO4 |
800,00 |
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VITAMINAS |
mg/L |
AMINOÁCIDOS |
mg/L |
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biotina |
0,200 |
L-arginina.HCL |
200,00 |
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pantotenato de cálcio |
0,250 |
L-asparigina.H2O |
50,00 |
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cloreto de colina |
3,000 |
L-ácido aspártico |
20,00 |
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ácido fólico |
1,000 |
L-cistina |
50,00 |
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inositol |
35,000 |
L-ácidoglutâmico |
20,00 |
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nicotinamida |
1,000 |
L-glutamina |
300,00 |
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ácido p-aminobenzóico |
1,000 |
glicina |
10,00 |
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piridoxina.HCL |
1,000 |
L-histidina.HCL.H2O |
15,00 |
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riboflavina |
0,200 |
L-hidroxiprolina |
20,00 |
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tiamina.HCL |
1,000 |
L-isoleucina |
50,00 |
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vitaminaB12 |
0,005 |
L-leucina |
50,00 |
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L-lisina.HCL |
40,00 |
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OUTROS COMPONENTES |
mg/L |
L-metionina |
15,00 |
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glicose |
2.000,00 |
L-fenilalanina |
15,00 |
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glutatione |
1,00 |
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vermelho de fenol |
5,00 |
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