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MEIO
RPMI 1640 C/ HEPES
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CARACTERÍSTICA FISIO-QUÍMICAS:
· Aspecto : Pó róseo e homogêneo
· Tamanho das Particulas : aproximadamente 20 microns
· Solubilidade : solução límpida na concentração de uso (1x)
· pH a 25°C (Sem NaHCO3) : 6,8 + 0,5
· pH a 25°C (ComNaHCO3) : 7,0 + 0,5
· Osmolaridade (sem NaHCO3) : 260 + 5%
· Osmolaridade (com NaHCO3) : 290 + 5%
CONSERVAÇÃO: Estocar o meio em pó ou preparado líquido entre
2 à 6°C. Se essas condições não forem
mantidas, poderão ser observadas alterações do
tipo:
1. Mudança de Cor
2. Granulações
3. Insolubilidade
4. Alteração de pH
5. Incapacidade de manter a integridade celular sob condições
normais.
PREPARAÇÃO: O MEIO RPMI 1640 em pó é
extremamente higroscópico, devendo ser protegido do meio ambiente.
Não são recomendadas preparações de concentrações
maiores que aquelas especificadas, devido a grande possibilidade de
formação de precipitados.
1.) Medir aproximadamente 90% do volume a ser preparado de água
tridestilada (15 - 20°C).
2.) Adicionar lentamente o pó sob agitação constante.
NÃO AQUEÇA A ÁGUA.
3.) Depois que o pó estiver totalmente dissolvido, acrescentar
por litro 2,0g de bicarbonato de sódio 5,6%.
4.) Acrescentar antibióticos ou outras substâncias que
julgar necessário.
5.) Poder-se-á acertar o pH conforme o desejado, utilizando-se
HCl 1N ou NaOH 0,1N, ou ainda, gaseificando-se com CO2.
6.) Completar o volume com água tridestilada e esterilizar
por filtração em membranas de 0,22m, utilizando pressão
positiva.
APRESENTAÇÃO: PÓ - Frascos com pó
para
preparo
de 1, 10 e 50 litros.
LÍQUIDO - Frasco com 100 ml.
CONSERVAÇÃO: 2 à 6°C
VALIDADE: 12 meses
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DEFINIÇÃO: É uma mistura de sais enriquecidos com aminoácidos, vitaminas e outros componentes essenciais para o crescimento celular.
AÇÃO: Age como uma solução nutritiva em cultivo celular.
INDIÇAÇÃO: Destina-se à cultura de células humanas e de outros animais. Este meio é fornecido na forma desidratada, em pó ou líquido. Na forma de pó ele tem a vantagem de se manter estável por mais 24 meses se conservado bem fechado e em geladeira. Outra grande vantagem do meio em pó é a constância de resultados quando se programam culturas celulares a longo prazo, utilizando nesse caso um mesmo lote. O MEIO RPMI 1640, por não ter timidina na sua composição, é muito utilizado para obter a sincronização da divisão celular.
VANTAGENS: Testado em pelo menos três linhagens diferentes, sendo sempre determinado o seu pH e osmolaridade, cada lote só é liberado se estiver dentro dos limites adequados, além de promover um ótimo crescimento celular. |
COMPOSIÇÃO MEIO
RPMI 1640
SAIS
INORGÂNICOS |
mg/L
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|
L-triptofano
|
5,00
|
Ca(NO3)2.4H2O
|
100,00
|
|
L-prolina
|
20,00
|
KCL
|
400,00
|
|
L-tirosina
|
28,00
|
MgSO4.7H2O
|
100,00
|
|
L-serina
|
30,00
|
NaCl
|
6.000,00
|
|
L-valina
|
20,00
|
NaHCO3
|
2.000,00
|
|
L-treonina
|
20,00
|
Na2HPO4
|
800,00
|
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VITAMINAS |
mg/L
|
AMINOÁCIDOS |
mg/L
|
|
biotina
|
0,200
|
L-arginina.HCL
|
200,00
|
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pantotenato
de cálcio |
0,250
|
L-asparigina.H2O
|
50,00
|
|
cloreto
de colina |
3,000
|
L-ácido
aspártico |
20,00
|
|
ácido
fólico |
1,000
|
L-cistina
|
50,00
|
|
inositol
|
35,000
|
L-ácidoglutâmico
|
20,00
|
|
nicotinamida
|
1,000
|
L-glutamina
|
300,00
|
|
ácido
p-aminobenzóico |
1,000
|
glicina
|
10,00
|
|
piridoxina.HCL
|
1,000
|
L-histidina.HCL.H2O
|
15,00
|
|
riboflavina
|
0,200
|
L-hidroxiprolina
|
20,00
|
|
tiamina.HCL
|
1,000
|
L-isoleucina
|
50,00
|
|
vitaminaB12
|
0,005
|
L-leucina
|
50,00
|
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|
L-lisina.HCL
|
40,00
|
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OUTROS
COMPONENTES |
mg/L
|
L-metionina
|
15,00
|
|
glicose
|
2.000,00
|
L-fenilalanina
|
15,00
|
|
glutatione
|
1,00
|
|
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|
vermelho
de fenol |
5,00
|
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hepes |
5.960,00 |
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