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 MEIO
DULBECCO MEM |
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CARACTERÍSTICAS FISIO-QUÍMICAS:
-Aspecto: Pó róseo e homogêneo
-Tamanho das Particulas : aproximadamente 20 microns
-Solubilidade:solução límpida na concentração de uso 1X
-pH a 25°C (Sem NaHCO3) : 6,3 + 0,5
-pH a 25°C (ComNaHCO3) : 7,7 + 0,5
-Osmolaridade (sem NaHCO3) : 234 + 5%
-Osmolaridade (com NaHCO3) : 310 + 5
CONSERVAÇÃO: Estocar o meio em pó ou preparado líquido entre 2 à 6°C. Se essas condições não forem mantidas, poderão ser observadas alterações do tipo:
1. Mudança de Cor
2. Granulações
3. Insolubilidade
4. Alteração de pH
5. Incapacidade de manter a integridade celular sob condições normais.
PREPARAÇÃO: O MEIO DULBECCO MEM em pó é extremamente higroscópico, devendo ser protegido do meio ambiente. Não são recomendadas preparações de concentrações maiores que aquelas especificadas, devido a grande possibilidade de formação de precipitados.
1. Medir aproximadamente 90% do volume a ser preparado de água tridestilada (15 - 20°C).
2. Adicionar lentamente o pó sob agitação constante. NÃO AQUEÇA A ÁGUA.
3. Depois que o pó estiver totalmente dissolvido, acrescentar por litro 3,7g de bicarbonato de sódio 5,6%.
4. Acrescentar antibióticos ou outras substâncias que julgar necessário.
5. Poder-se-á acertar o pH conforme o desejado, utilizando-se HCl 1N ou NaOH 0,1N ou ainda, gaseificando-se com CO2.
6. Completar o volume com água tridestilada e esterilizar por filtração em membranas de 0,22m, utilizando pressão positiva.
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DEFINIÇÃO: É uma mistura de sais enriquecidos com aminoácidos e outro componentes essencias para o crescimento celular.AÇÃO : Age como uma solução nutritiva em cultivo celular.
INDICAÇÃO: Destina-se a cultura de células humanas (diplóides, melona, etc.) e de outros animais. Este meio é fornecido na forma em pó e líquida. Na forma em pó ele tem a vantagem de se manter estável por mais de 24 meses se conservado bem fechado e em geladeira. Outra grande vantagem do meio DULBECCO EM PÓ é a constância de resultados quando se programam culturas celulares a longo prazo utilizando nesse caso um mesmo lote. Determinadas células crescem muito bem com esse meio, como células de pulmão fetal, rins e células de linhagens.
VANTAGENS: Testado em pelo menos três linhagens celulares diferentes, sendo sempre determinados o seu pH e osmolaridade. Cada lote é liberado se estiver dentro dos limites adequados, além de promover um ótimo crescimento celular. |
COMPOSIÇÃO MEIO
DULBECCO MEM
SAIS INORGÂNICOS |
mg/L |
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L-serina |
42,00 |
CaCl2H2O |
265,00 |
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L-treonina |
95,00 |
Fe(NO3)3.9H2O |
0,10 |
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L-triptofano |
16,00 |
KCL |
400,00 |
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L-tirosina |
104,20 |
MgSO4.7H2O |
200,00 |
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L-valina |
94,00 |
NaCL |
6.400,00 |
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NaH2PO4H2O |
125,00 |
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VITAMINAS |
mg/L |
NaHCO3 |
3.700,00 |
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Cloreto de Colina |
4,00 |
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Pantotenato de cálcio |
4,00 |
AMINOÁCIDOS |
mg/L |
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Ácido fólico |
4,00 |
L-arginina.HCL |
84,00 |
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Inositol |
7,20 |
L-cistina |
62,57 |
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Nicotinamida |
4,00 |
L-glutamina |
584,00 |
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Piridoxal.HCL |
4,00 |
Glicina |
30,00 |
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Riboflavina |
0,40 |
L-histidina.HCL.H2O |
42,00 |
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Tiamina.HCL |
4,00 |
L-isoleucina |
105,00 |
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L-leucina |
105,00 |
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OUTROS COMPONENTES |
mg/L |
L-lisina.HCL |
146,00 |
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Glicose |
1.000,00 |
L-metionina |
30,00 |
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Piruvato de sódio |
110,00 |
L-fenilanina |
66,00 |
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Vermelho de fenol |
15,00 |
IMPORTANTE:
Todos os Meios Líquidos VITROCELL
prontos para uso contém antibiótico/antimicótico
Sulfato de Gentamicina: 50 mg/L
Anfotericina B: 25 µg/ml |
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